在植物中生产胰岛素的方法
2020-01-12

在植物中生产胰岛素的方法

本发明描述了在植物内生产胰岛素的方法。在一个实施方案中,本发明提供了在植物内表达胰岛素的方法,包括:(a)提供嵌合核酸构建体,其在5’至3’的转录方向包括可操纵连接的下列组分:(i)可在植细胞内控制表达的核酸序列;和(ii)编码胰岛素多肽的核酸序列;(b)把嵌合核酸构建体导入植物细胞内;以及(c)令植物细胞成长为成熟植物,可结种子,其中种子表达胰岛素。

SEQIDNO:51

MGLWIRLLPLIALLILWGPDPAAAEFRMFVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPK

0714] SEQIDNO:153

(b)编码胰岛素多肽的第二核酸序列,其中种子含有胰岛素。

按照本发明,意外发现如果以在允许胰岛素多肽在种子细胞内被隔离(sequestration)在膜包围的细胞内区室中的方式在种子内表达胰岛素,则胰岛素在植物种子内累积的水平可以达到以前未达到的水平。因此,本发明提供了在植物内表达胰岛素的优选方法,所述方法包括:

一旦已获得植物种子,即可使用本领域已知的任何蛋白质纯化方法从种子中纯化胰岛素蛋白质。因此,本发明提供了从植物种子纯化胰岛素的方法,其中所述方法包括:

accacgtcagtgaacctcatggccgatgatactgagagcgcgtttgctacacaaacaaat

实施例4

胰岛素耐受试验:C57BI/6(B6)雄鼠中的生物分析

(a)提供嵌合核酸构建体,在5’至3’转录方向包括下列可操纵连接的组分: